Определение альбуминов в сыворотке крови

Определение концентрации альбумина в сыворотке крови по реакции с бромкрезоловым зеленым

Определение альбуминов в сыворотке крови

Принцип метода: Метод основан на образовании окрашенных комплексных соединений при взаимодействии альбумина с бромкрезоловым знленым в слабокислой среде в присутствии детергента.

Интенсивность окраски пробы при длине волны 630 нм прямо пропорциональна концентрации альбумина в ней.

Линейность метода: 20-60 г/л.

Норма: 35-50 г/л. (18-25°С);

Оборудование и реагенты:

1) Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 630 (590-640) нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 18-25°С;

2) Секундомер;

3) Автоматические пипетки на 5мкл и 1000 мкл;

4) Сыворотка крови/ плазма негемолизированные;

5) Рабочий реагент (бромкрезоловый зеленый 74 мг, детергент Тритон Х-100 в ацетатном буфере);

6) Стандарт (раствор альбумина 40 г/л);

7) Дистиллированная вода.

Проведение анализа

Добавить в кювету Опытная проба Холостая проба Стандартная проба
1. Сыворотка 5 мкл
2. Стандарт 5 мкл
3. Дистиллиро-ванная вода 5 мкл
4. Рабочий реагент 1 мл 1 мл 1 мл

Перемешать тщательно в течение 15 секунд содержимое пробирок, избегая образования пены. Инкубировать при комнатной температуре 10 минут. Измерить оптическую плотность опытной и стандартной проб против холостой пробы при длине волны 630 (590-640) нм. Окраска стабильна в течение 8 часов.

Расчет

Расчет по стандарту концентрации альбумина в сыворотке (плазме) проводят по формуле:

Аоп С (г/л) = ———– ´ Сст, Аст

где Аоп и Аст – оптическая плотность опытной и стандартной проб,

соответственно;

Сст – концентрация стандарта.

Если концентрация альбумина превышает 60 г/л (точка вне зоны линейности калибровочного графика), анализируемый образец (сыворотка или плазма) следует развести 1:1 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат расчета умножить на 2.

Клинико-диагностическое значение: Гиперальбуминемия наблюдается при тех же состояниях, что и гиперпротеинемия.

Гипоальбуминемия наступает при больших потерях белка, связанных с кровотечением, нарушением синтеза белка в печени и усилением процессов его распада.

Лабораторная работа № 18.

Определение концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови иммунотурбидиметрическим методом

Принцип метода: С-реактивный белок (СРБ) сыворотки взаимодействует с моноспецифическими антителами, присутствующими в избытке в реакционной смеси с образованием преципитата, усиленного ПЭГ.

Турбидиметрическое определение концентрации СРБ основано на регистрации оптической плотности анализируемой пробы при длине волны 340 нм.

Диапазон измерения метода: 8-150 мг/л.

Норма: до 10 мг/л (37°С);

СРБ в сыворотке сохраняет стабильность при замораживании (-20°С) в течение 6 месяцев.

Оборудование и реагенты:

1) Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 340 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 37°С;

2) Секундомер;

3) Автоматические пипетки на 75 мкл, 200 мкл и 1000 мкл;

4) Сыворотка крови негемолизированная / плазма;

5) СРБ-буфер (ТРИС-буфер 0,01 моль/л, содержащий 5% ПЭГ);

6) Антисыворотка против СРБ;

7) Калибровочные растворы №№ 1-5 с указанной на этикетках концентрацией СРБ;

8) Физиологический раствор (хлорид натрия 0,9%).

Антисыворотка разводится в 3 раза (1:2) СРБ буфером с ПЭГ (полиэтиленгликолем). Разведенная антисыворотка годна для применения при условии хранения его при температуре 2-8°С в течение 30 дней.

Проведение анализа

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до температуры измерения (37°С).

Добавить в кювету   Холостая проба Опытная проба Стандартная проба
1. Стандарт 75 мкл
2. Сыворотка 75 мкл
3. Буфер для СРБ 1 мл 1 мл 1 мл
Перемешать в течение 15 с. Инкубировать 10 минут при температуре 37°С. Измерить оптическую плотность холостой пробы.
4. Антисыворотка против СРБ 200 мкл 200 мкл

Перемешивать содержимое пробирок в течение 15 секунд. Измерить оптическую плотность проб при длине 340 нм ровно через 5 минут после добавления антисыворотки.

Расчет

Расчет концентрации СРБ проводят по нелинейной калибровочной кривой:

№ стандар-та Оптическая плотность при 340 нм № стандар-та Оптическая плотность при 340 нм
Стандарт 1 Стандарт 4
Стандарт 2 Стандарт 5
Стандарт 3

Если концентрация СРБ пробы выше самой высокой концентрации стандартного раствора СРБ (точка вне рабочей зоны калибровочного графика), анализируемую сыворотку следует развести 1:4 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат умножить на 5.

Клинико-диагностическое значение: СРБ – это a2-глобулин и компонент неспецифического иммунного ответа на ранних стадиях проникновения антигена в организм. СРБ способствует удалению из крови эндогенных веществ, образующихся в результате разрушения клеток организма (полисахариды, гликопротеины, нуклеиновые кислоты, фосфатидилхолин и пр.).

СРБ относится к белкам острой фазы. При тяжелых воспалениях синтез его в печени возрастает более, чем в тысячу раз. Уровень СРБ в крови увеличивается в течение 6-10 часов в реакциях острой фазы (разрушение тканей, воспаление).

Концентрация СРБ у курильщиков может достигать 25 мг/л. После хирургического вмешательства (если нет осложнений) СРБ держится в течение 2 дней на уровне до 150 мг/л, а затем возвращается в норму.

https://www.youtube.com/watch?v=RuA0uXdZJfQ

Плохим прогностическим признаком является СРБ > 200 мг/л на протяжении 10 дней и более после хирургического вмешательства. За 1-2 дня до летального исхода СРБ заметно увеличивается.

Определение концентрации СРБ используют для отличия бактериальных инфекций от вирусных. Концентрация СРБ до 50 мг/л обычно наблюдается при легких вирусных инфекциях и местных бактериальных инфекциях; 50-150 мг/л – в основном при бактериальных инфекциях и в отдельных случаях при тяжелых вирусных инфекциях; > 150 мг/л – при тяжелых бактериальных инфекциях.

Максимальная концентрация СРБ может доходить до 400 мг/л у новорожденных и примерно до 850 мг/л у взрослых.

Лабораторная работа № 19.

Определение компонентов мочи с помощью диагностических полосок (HUMAN-Test Combina)

Принцип метода: В основе работы тест-полосок лежат методы сухой химии. Полоски предназначены для полуколичественного определения компонентов мочи по результатам цветных и ферментативных реакций в толще полоски.

Интенсивность окраски тестовой области полоски сравнивается с цветовой шкалой для каждого компонента.

Оборудование и реагенты:

1) Тест-полоски;

2) Свежесобранная моча;

3) Цветовые шкалы для показателей на этикетке контейнера для тест-полосок.

Проведение анализа

1. Погрузить полоску в мочу на 1-2 секунды так, чтобы намочить все тестовые области.

2. Удалить излишек мочи с полоски проведя ею по краю емкости с мочой.

3. Держать полоску горизонтально в течение 1-2 минут.

4. Сравнить цвета всех тестовых областей полоски с соответствующими цветовыми шкалами на этикетке контейнера. Сравнение должно проводится не позднее, чем через 2 минуты! Цвет на краях тестовых областей не учитывается.

Компо-нент мочи Принцип метода Результат Норма Клинико-диагностическое значение
1. Удель-ный вес Ионный обмен между электролитом тестовой области и ионами, растворенными в моче, что вызывает изменение окраски индикатора . Сине-зеленый цвет для низкой ионной силы до желто-коричневого цвета для концентрированной мочи. ³ 1,018 для утренней мочи. Удельный вес зависит от концентра-ции растворен-ных в моче веществ. Очень высокие и низкие цифры плотности для утренней мочи требуют установления причины. Низкий удельный вес обычно связан с полиурией, а высокий чаще бывает при глюкозуриях.
2. Нитриты Реакция Грисса: сульфаниламид стетрагидробензо-хинолином реагируют с продуктами метаболизма энтеробактерий. Любая степень окраски в оранжево-розовый цвет свидетельствует о присутствии не менее 105 микроорганизмов в 1 мл мочи< 103 микроорга-низмов в мл мочи Определенная степень бактериурии указывает на наличие воспалительного процесса. Отрицательный результат не исключает бактериурии и может говорить об инфицировании бактериями, не содержащими нитрат-редуктазы
3. рН Двойной индикатор: метиловый красный и бромтимоловый синий Диапазон окраски от оранжевого через желтый и зеленый до синего, что соответствует рН от 5 до 9. рН свежей мочи находится в диапазоне 5-6 При смешанной пище в организме образуются кислые продукты обмена. Кислотность увеличивается при сахарном диабете, туберкулезе почек и почечной недостаточности. Щелочная реакция мочи характерна при рвоте, приеме щелочных лекарств, хронической инфекции мочевыводящих путей
4. Белок/ альбумин Сдвиг рН индикатора тетрабромфеноло-вого синего, чувствительный к альбумину При выраженной протеинурии окраска соответствует содержанию белка > 0,3 г/л Ниже порога чувстви-тельности теста Белок в моче появляется при усиленном распаде белка тканей, при гемолизе, при патологии почек, при воспалении мочевыводящих путей.
5. Глюкоза Ферментативный глюкозооксидазный метод, специфичный для глюкозы Зеленоватый оттенок тестовой области свидетельствует о небольших количествах глюкозы в моче Глюкоз урия до 0,2 г/л не обнаружи-вается Появление глюкозы в моче зависит от ее концентрации в крови, от фильтрационной способности почек и от реабсорбционных процессах в канальцах нефрона. Глюкоза появляется также при раздраждении ЦНС, гипертиреозе, патологии печени. Глюкозурия может иметь алиментарную и лекарственную причины.
6.Кетоны Взаимодействие ацетона и ацетоуксусной кислоты с нитропруссидом натрия в щелочной среде (тест Легаля) При наличии кетонов образуется комплекс фиолетового цвета. Красное окрашивание может быть вызвано наличием фталеиновых соединений Отсутству-ют в моче Появление кетонов в моче может быть вызвано физиологическим стрессом (голодание, беременность, спорт), но чаще наблюдается при диабете и свидетельствует о неправильном пищевом режиме.
7. Уроби-линоген Реакция связывания уробилиногена стабилизированными солями диазония Желтая окраска тестовой области с последующим переходом в зелено-голубой цвет 1,7-30 мкмоль/л Паталогическая концентрация уробилиногена – характерный симптом поражения паренхимы печени (гепатиты, цирроз), гемолитических состояний и заболеваний кишечника (энтериты, запоры, кишечная непроходимость). Полное отсутствие говорит о нарушении поступления желчи в кишечник.
8. Билиру-бин Связывание билирубина со стабилизированны-ми солями диазония в сильнокислой среде Желто-оранжевая окраска тестовой области Отсутству-ет в моче Следовые количества билирубина свидетельствуют о ранних заболеваниях печени и нарушении оттока желчи и требуют дальнейшего обследования.

Клинико-диагностическое значение: Тест-полоски предназначены для скрининговых исследований мочи в целях диагностики диабета, заболеваний печени, гемолитических болезней, урогенитальной и почечной патологии, а также нарушений метаболизма и кислотно-щелочного баланса.



Источник: https://infopedia.su/14x1729d.html

Альбумин в крови :: описание, нормы, причины, клиники

Определение альбуминов в сыворотке крови

 Название: Альбумин в крови.

Альбумин в крови

 Исследование альбумина в крови. Биохимический анализ для количественного определения самой большой фракции белка в сыворотке крови. Всего выделяют пять белковых фракций: одну фракцию альбумина и четыре глобулина (альфа1, альфа2, бета и гамма глобулины).

Альбумин в крови составляет 60% общего белка плазмы, синтезируется в печени, является основным онкотическим компонентом плазмы и служит основным источником аминокислот. Определение уровня альбумина в крови используется для диагностики и мониторинга заболеваний почек, печени, рака и состояния пациентов с травмами и ожогами.

Кровь взята из вены для анализа. Анализ занимает один день.

 Альбумин представляет собой простой глобулярный белок с молекулярной массой 66,3 Да. Синтез альбумина происходит в клетках печени. Скорость синтеза контролируется двумя факторами: потребление белка с пищей и сила онкотического давления. Альбумин расщепляется в лизосомах. Измерение альбумина является частью лабораторного теста функции печени.

Альбумин в крови поддерживает осмотическое давление, выполняет транспортную функцию (передача билирубина, желчных кислот, витаминов, ионов металлов, лекарств) и служит резервом белка для организма. Существует много методов определения сывороточного альбумина. Фотометрический метод бромкрезолового зеленого стандартизирован.

Существует также иммунологический метод и электрофорез (последний очень трудоемкий).

Альбумин в крови

 Альбумин является наиболее важным показателем, с помощью которого можно оценить общее состояние здоровья человека. Анализ крови на альбумин часто проводится в сочетании с ферментами, которые отражают функцию печени (ALT, AST, GGT).

Это связано с тем, что альбумин синтезируется клетками печени и при повреждении синтез альбумина нарушается. Таким образом, анализ показан для мониторинга состояния пациентов с заболеваниями печени.

 Исследование содержания альбумина в крови используется у пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта (синдром мальабсорбции, гастрит, энтерит), так как у них отмечается абсорбция белка.

Исследование также проводится на пациентах с заболеванием почек (нефротический синдром, диабетическая нефропатия), тяжелыми ожогами и травмами, ревматическими и онкологическими заболеваниями.

 Для анализа используется плазма крови. Рекомендуется сдавать кровь на альбумин утром (с 8 до 10 часов), строго натощак (последний прием пищи не позднее, чем через 12 часов, рекомендуется легкий ужин накануне).

За 24 часа до теста необходимо исключить употребление алкоголя, а также принятие тепловых процедур (баня, сауна). При проведении повторных исследований рекомендуется сдавать кровь одновременно и в одной и той же лаборатории – чтобы результаты были максимально надежными.

Кроме того, рекомендуется брать образцы крови перед приемом лекарств и других медицинских процедур (уколы, массаж, рентген).
 В этом тесте кровь берется из вены с помощью шприца или вакуумной системы. Кровь доставляется в лабораторию в специализированных транспортных ящиках.

Анализ проводится в течение часа, при большой нагрузке на лабораторию биологический материал помещается в холодильник. Определение сывороточного альбумина проводят с помощью унифицированного колориметрического метода с бромкрезоловым зеленым. Этот метод прост, точен и недолговечен.

Результат дается пациенту или врачу в течение часа или в конце дня (время выдачи результата зависит от методологии, оборудования и лабораторной нагрузки).

 Обычно содержание сыворотки в здоровом альбумине составляет от 35 до 50 г / л у здорового человека, тогда как значения для мужчин и женщин одинаковы. В течение жизни человека быстрых колебаний уровня альбумина в крови не наблюдается. Так, для детей нормальные значения составляют от 38 до 54 г / л, а для пожилых людей – от 34 до 48 г / л.

Небольшое снижение уровня альбумина в крови характерно для беременных и кормящих женщин. На характеристики питания могут влиять результаты анализа (чрезмерное потребление белковой пищи приводит к увеличению содержания альбумина в крови), стрессовые ситуации и особенности строения пациента.

Изменения уровня альбумина в крови по физиологическим причинам невелики и не сохраняются.

 Увеличение уровня альбумина в крови называется гиперальбуминемией. Существует только относительная гиперальбуминемия.

Любое состояние, связанное с потерей воды (обезвоживание организма), особенно рвота и диарея, может привести к повышению уровня альбумина в крови.

Причиной гиперальбуминемии является реже внутривенное вливание большого количества раствора альбумина, концентрация крови (свертывание крови), коллагеноз (ревматоидный артрит, СКВ и т. Д. ).

 Гипоальбуминемия – это снижение уровня альбумина в крови. Гипоальбуминемия может быть врожденной (первичной), чаще всего встречающейся у новорожденных с нарушенной и вторичной функцией печени. Вторичная гипоальбуминемия развивается вследствие различных патологических состояний.

Снижение уровня альбумина в крови может наблюдаться при недостаточном приеме пищи (голодание, несбалансированное питание), а также при низкой абсорбции в кишечнике из-за различных заболеваний (синдром мальабсорбции, энтерит).

Хронические заболевания печени (гепатит, цирроз печени, печеночная недостаточность), при которых нарушается синтез эндогенного альбумина, могут быть причинами снижения уровня альбумина в крови.

 Снижение уровня альбумина наблюдается при различных инфекционных заболеваниях, сепсисе, паразитарных поражениях, некротических процессах и злокачественных новообразованиях.

Повышенная потеря белка сопровождается диабетической нефропатией и нефротическим синдромом, кровотечением, ожогами и травмами, образованием транссудатов и экссудатов в серозных полостях. Гипоальбуминемия также возникает во время беременности, принимая лекарства: эстроген, КОК, высокие дозы преднизона, азатиоприн, вальпроевую кислоту и другие. Снижение содержания альбумина ниже 22-24 г / л сопровождается развитием отека легких.

 Определение концентрации альбумина в крови позволяет выявлять большое количество заболеваний, а также отслеживать их динамику. Чтобы определить причину изменения значений альбумина, обратитесь к врачу, который назначит дополнительный тест и поставит диагноз. Важно отметить, что лечение не проводится на основе одного биохимического показателя; Требуется комплексное обследование и определение значения альбумина в динамике.  Лечение в зависимости от диагноза назначается гастроэнтерологом, нефрологом, гепатологом, инфекционистом. Изменение уровня альбумина в крови по физиологическим причинам не требует лечения. Рекомендуется избавиться от провокационных факторов: исключить тяжелые физические нагрузки, стрессы, нормализовать питание.

 Читать дальше.

КлиникаЦенаТелефон
Клиника Андрологии во 2-м Сыромятническом переулке г. Москва, 2-й Сыромятнический пер., д. 10м. Чкаловская+7(495) 916..показать+7(495) 916-13-30+7(495) 916-23-17+7(495) 916-07-35
Медицинский центр иммунокоррекции им. Ходановой РН г. Москва, ул. Давыдковская, д. 6м. Славянский бульвар+7(495) 152..показать+7(495) 152-58-36+7(499) 445-40-83+7(495) 740-61-75
Клиника Герасимова на Болотниковской г. Москва, ул. Болотниковская, д. 5, корп. 2м. Варшавская+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-25+7(499) 613-40-02
КДС Клиник на Белозерской г. Москва, ул. Белозерская, д. 17Гм. Бибирево+7(495) 374..показать+7(495) 374-03-63
САН Клиник в Шведском переулке г. Санкт-Петербург, Шведский пер., д. 2м. Невский проспект+7(812) 416..показать+7(812) 416-97-03+7(812) 416-97-05+7(812) 210-92-76
МЦ Здоровье на Мира г. Санкт-Петербург, ул. Мира, д. 16м. Горьковская+7(812) 306..показать+7(812) 306-27-72
Клиника функциональных нарушений на Габричевского г. Москва, ул. Габричевского, д. 5, корп. 3м. Щукинская+7(495) 152..показать+7(495) 152-58-35+7(495) 363-07-54+7(499) 654-08-00
Benessere в Электрическом переулке г. Москва, Электрический пер., д. 8, стр. 5м. Белорусская+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-51+7(499) 745-09-29
ФМИЦ им. В.А. Алмазова г. Санкт-Петербург, ул. Аккуратова, д. 2м. Удельная+7(812) 702..показать+7(812) 702-37-06+7(812) 702-37-03+7(812) 702-51-91
Гарвей на Пушкинской г. Санкт-Петербург, пос. Шушары, ул. Пушкинская, д. 38м. Купчино+7(812) 986..показать+7(812) 986-92-90
Клиника В. Морозова в Зеленограде г. Зеленоград, пр-т Панфиловский, д. 10м.+7(495) 944..показать+7(495) 944-77-70+7(499) 734-22-17
Центр аппаратной косметологии в Зеленограде г. Зеленоград, Савелкинский пр-д, д. 4Ам.+7(916) 279..показать+7(916) 279-40-51+7(916) 279-39-41
ФГБНУ НИИ глазных болезней г. Москва, ул. Россолимо, д. 11 корп. А, Бм. Парк Культуры+7(499) 409..показать+7(499) 409-04-69+7(499) 248-01-28+7(499) 248-78-92+7(499) 248-04-69
МРНЦ им. А.Ф. Цыба в Обнинске г. Обнинск, ул. Королёва, д. 4м.+7(484) 399..показать+7(484) 399-31-30+7(495) 150-11-22+7(484) 399-31-15
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии г. Санкт-Петербург, ул. 2-я Советская, д. 16м. Площадь Восстания+7(812) 717..показать+7(812) 717-07-97+7(812) 559-95-95+7(812) 271-44-31+7(812) 710-23-09
Городской кожно-венерологический диспансер г. Санкт-Петербург, наб. реки Волковки, д. 3м. Волковская+7(812) 766..показать+7(812) 766-33-43+7(812) 766-32-29+7(812) 573-99-17
Алодерм на Ленинском проспекте г. Москва, Ленинский пр-т, д. 99м. Проспект Вернадского+7(499) 519..показать+7(499) 519-36-94+7(499) 688-83-98+7(968) 606-94-01
Medclinic на Бауманской г. Москва, ул. Бауманская, д. 56/17м. Бауманская+7(495) 276..показать+7(495) 276-06-20+7(499) 265-69-63+7(963) 669-44-73+7(495) 645-93-65
Гинмед на Головинском шоссе г. Москва, Головинское шоссе, д. 8, корп. 3м. Водный Стадион+7(495) 152..показать+7(495) 152-58-54+7(495) 452-48-61+7(495) 232-55-92
Тонус в Истре г. Истра, ул. Ленина, д. 6м.+7(495) 152..показать+7(495) 152-58-41+7(498) 315-20-84+7(968) 404-84-52
Medclinic на Измайловском шоссе г. Москва, Измайловское шоссе, д. 11м. Семеновская+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-25+7(495) 366-06-83+7(903) 171-87-27
Medclinic на Фонвизина г. Москва, ул. Фонвизина, д. 6м. Тимирязевская+7(495) 639..показать+7(495) 639-08-29+7(495) 610-41-11+7(903) 171-92-02+7(495) 645-93-65
Кураре-Хиругия в Полесском проезде г. Москва, Полесский пр-д, д. 16, стр. 6м. Щукинская+7(495) 488..показать+7(495) 488-40-99+7(499) 703-49-04
Аконит на Менжинского г. Москва, ул. Менжинского, д. 19, корп. 3м. Бабушкинская+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-25+7(495) 471-06-00+7(495) 470-90-18+7(910) 081-90-61
Нина Рич на Свободном проспекте г. Москва, Свободный пр-т, д. 37/18м. Новогиреево+7(495) 123..показать+7(495) 123-10-35+7(977) 136-62-05
ДНК-центр на Кржижановского г. Москва, ул. Кржижановского, д. 8, корп. 1м. Профсоюзная+7(499) 125..показать+7(499) 125-03-33+7(499) 125-19-63
МЦ Здоровье на проспекте Королева г. Санкт-Петербург, пр-т Королева, д. 48, корп. 5м. Комендантский проспект+7(812) 306..показать+7(812) 306-27-72
Медицинский Профилактический Центр г. Санкт-Петербург, ул. Александра Невского, д. 9м. Площадь Александра Невского+7(812) 380..показать+7(812) 380-73-87+7(812) 274-57-16
Клиника Доктора Клименко на 3-й Тверской-Ямской г. Москва, ул. 3-я Тверская-Ямская, д. 10м. Маяковская+7(495) 255..показать+7(495) 255-21-88+7(926) 204-11-75+7(963) 676-06-88
МЦ Здоровье на Лётчика Пилютова г. Санкт-Петербург, ул. Лётчика Пилютова, д. 6, корп. 2м. Проспект Ветеранов+7(812) 306..показать+7(812) 306-27-72
Мария-Мед на Фабрициуса г. Москва, ул. Фабрициуса, д. 13м. Сходненская+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-25+7(499) 519-61-35+7(495) 645-19-16+7(965) 128-00-03+7(499) 493-00-68
ГолденМед на Суздальской г. Москва, ул. Суздальская, д. 10, корп. 2м. Новокосино+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-02+7(495) 703-03-03+7(495) 984-01-01
Диона на Коллонтай г. Санкт-Петербург, ул. Коллонтай, д. 41, корп. 1м. Проспект Большевиков+7(812) 603..показать+7(812) 603-42-03
Даная на проспекте Энгельса г. Санкт-Петербург, пр-т Энгельса, д. 154м. Проспект Просвещения+7(812) 515..показать+7(812) 515-10-05+7(981) 106-52-46
Даная на бульваре Новаторов г. Санкт-Петербург, б-р Новаторов, д. 11м. Ленинский проспект+7(812) 372..показать+7(812) 372-24-24+7(812) 372-14-62
УникаМед на Каширском шоссе г. Москва, Каширское шоссе, д. 12, стр. 1м. Нагорная+7(499) 519..показать+7(499) 519-37-39+7(495) 215-18-19
СлимХауз в Золоторожском проезде г. Москва, Золоторожский пр-д, д. 2м. Площадь Ильича+7(495) 707..показать+7(495) 707-10-10+7(495) 364-29-45
ДКБ им. Семашко г. Москва, ул. Ставропольская, д. 23, корп. 1м. Люблино+7(499) 266..показать+7(499) 266-98-98
Диона на Академика Лебедева г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 11-13м. Площадь Ленина+7(812) 679..показать+7(812) 679-03-03
Диона на проспекте Луначарского г. Санкт-Петербург, пр-т Луначарского, д. 21, корп. 1м. Озерки+7(812) 416..показать+7(812) 416-37-89+7(812) 603-42-00
Ещё клиник – 587. используйте фильтры

42a96bb5c8a2ac07fc866444b97bf1 Модератор контента: Васин А.С.

Источник: https://kiberis.ru/?p=91649

Лабораторная работа №3

Количественное определение альбумина в сыворотке крови методом,

основанным на биуретовой реакции

Принцип метода. При добавлении к пробам сыворотки крови этанольного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) определенной концентрации альбумин, в отличие от других белков, не подвергается осаждению, оставаясь в подкисленном спиртовом растворе, что позволяет установить его содержание методом, основанным на биуретовой реакции.

Исследуемый материал. Сыворотка или плазма крови.

Реактивы и их приготовление. 1. Раствор хлористого натрия (изотонический). 0,9 г NaCl растворяют в 100 мл дистиллированной воды.

2. 0,2 н. раствор едкого натра, освобожденный от углекислого газа. 20 мл 1 н. раствора NaОН доводят до объема 100 мл прокипяченной дистиллированной водой.

3. Биуретовый реактив. 4,5 г сегнетовой соли (КNаС4Н4О6) растворяют в 40 мл 0,2 н. NaОН. После растворения прибавляют 1,5 г СuSO4·5Н2О и 0,5 г КI. Раствор доводят до 100 мл 0,2 н. NaОН. Хранят в темном месте (или в посуде из темного стекла). Реактив пригоден около месяца.

4. Щелочной раствор йодистого калия. 0,5 г КI растворяют в 100 мл 0,2 н. NaОН. Хранят в посуде из темного стекла не более двух недель.

5. Рабочий раствор биуретового реактива. 20 мл биуретового реактива (3) смешивают с 80 мл раствора Кl (4). Хранят в темном месте не более двух недель.

6. Стандартный раствор альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки). 1,0 г альбумина растворяют в мерной пробирке в 6-7 мл изотонического раствора NaCl с последующим доведением им до конечного объема 10 мл.

Для полного растворения белка содержимое пробирки выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин.

Поскольку пенообразование ускоряет разрушение альбумина, с целью предотвращения этого нежелательного эффекта можно внести одну (или несколько) капель октилового спирта либо медицинского (диэтилового) эфира, понижающих поверхностное натяжение.

1 мл стандартного раствора содержит 0,1 г белка (100 г/л). Можно использовать ампулированный раствор альбумина с концентрацией 100 (или 98) г/л.

7. Дополнительно используют реактив для выделения альбумина. Для его получения 3 г ТХУ растворяют в 100 мл 96% этанола. Реактив стоек.

Ход анализа

В центрифужную пробирку внесите 0,75 мл реактива для выделения альбумина и 0,25 мл исследуемой сыворотки крови.

После перемешивания содержимого пробирки спустя 10 мин выдерживания пробы при комнатной температуре центрифугируйте ее в течение 10 мин при 1500 об/мин (на клинической центрифуге типа ОПН-3).

0,2 мл центрифугата (должен быть совершенно прозрачным) перенесите в другую химическую пробирку, в которую прилейте 5,0 мл рабочего раствора биуретового реактива.

Параллельно определите содержание общего белка в сыворотке крови, для чего к 0,1 мл ее добавьте 5,0 мл рабочего раствора биуретового реактива.

Пробы оставьте для окрашивания на 30 мин и фотометрируйте при 546 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см. Показатели абсорбции учитывают в сравнении с таковыми контрольной пробы (т.е. рабочего раствора биуретового реактива).

Расчет ведут по калибровочному графику. Для его построения из основного раствора белка (0,1 мл основного стандартного раствора содержит 0,01 г белка) готовят рабочие стандартные растворы, как указано в табл. 2.

Из каждого разведения берут по 0,1 мл рабочего раствора и вносят в пробирки, содержащие 5,0 мл рабочего биуретового реактива.

Через 30 мин замеряют оптическую плотность стандартных проб, учитывая абсорбцию контрольной пробы.

Таблица 2

Данные к построению калибровочного графика для определения содержания альбумина сыворотки крови.

Стандартный раствор белка, млИзотоническийраствор NaCl, млКонцентрацияальбумина, г/л
10,20,820
20,30,730
30,40,640
40,50,550
50,60,460
60,70,370

На основании построенной калибровочной кривой найдите фактор пересчета F (вычисляют фактор пересчета F делением концентрации белка на абсорбцию F = Сcm/Ecm).

Расчет концентрации. Для определения содержания альбумина в сыворотке крови значение оптической плотности (Е) умножьте на F и на 2 (коэффициент пересчета 0,05 мл сыворотки, приходящейся на 0,2 мл взятого для исследования центрифугата, на 0,1 мл используемой для определения содержания общего белка сыворотки крови):

С (г/л) = Еоп×F×2

где С– концентрация белка в г/л; Еоп – оптическая плотность опытной пробы, F – фактор пересчета.

Нормальные показатели. альбумина в сыворотке крови, определенное описанным способом, у практически здоровых взрослых людей составляет 40-50 г/л.

ЗАДАНИЕ

1. Определите содержание общего белка в плазме крови крыс биуретовым методом.

2. Определите концентрацию альбумина в плазме крови крыс предложенным методом.

3. Рассчитайте концентрацию альбумина в г/л и % от общего белка плазмы.

4. Сделайте вывод.

Источник: http://eor.dgu.ru/lectures_f/%D0%9A%D0%BB%D0%B8%D1%87%D1%85%D0%B0%D0%BD%D0%BE%D0%B2%20%D0%91%D0%B8%D0%BE%D1%85%D0%B8%D0%BC%D0%B8%D1%8F%20%D0%BA%D1%80%D0%BE%D0%B2%D0%B8/%D0%9B%D0%B0%D0%B1%D0%BE%D1%80%D0%B0%D1%82%D0%BE%D1%80%D0%BD%D0%B0%D1%8F%20%D1%80%D0%B0%D0%B1%D0%BE%D1%82%D0%B0%20%E2%84%96%203.htm

Что показывает альбумин в биохимическом анализе крови? Причины повышенного и пониженного альбумина

Определение альбуминов в сыворотке крови

Уровень альбумина в крови определяется с помощью биохимического анализа. Завышенные или заниженные показатели вещества, получаемого путем фракционирования, свидетельствуют о патологическом процессе в организме.

Альбумин или белковые фракции — наиболее часто встречающиеся исследуемые показатели, ведь вещество отражает, насколько полноценно работает печень по синтезу белков.

Интересный факт: в течение 2 суток печень продуцирует 15 грамм альбумина, приносящего пользу до 20 дней.

Альбумин — что это такое в биохимическом анализе крови?

Альбумин — основной белок в крови, составляющий более половины (от 50 до 65%) от общего количества плазмы.

Синтезируется печенью человека и располагается в периферийной крови, лимфе, спинномозговой и интерстициальной жидкости. Жизненный период альбумина длится 15-20 суток.

Белковое соединение низкомолекулярно, хотя фракция белков плазмы крови резервирует более 600 разновидностей аминокислот.

По результатам биохимического анализа крови и содержанию в кровяной сыворотке альбумина врач диагностирует работу почек и печени. Снижение концентрации белкового соединения указывает на наличие ревматизма и опухолей злокачественного характера.

На картинке: молекулярная структура сывороточного альбумина человека

Альбумины — важнейшие элементы в кровяной сыворотке, благодаря которым осуществляется полноценная деятельность организма.

Белки циркулируют с кровотоком и выполняют следующие функции:

  • наиважнейшая функция белковой фракции — связь и транспортировка различных веществ — гормонов, кислот, жиров, билирубина, кальция, соединения тканей.
  • Отвечает за поддержание давления в плазме крови, благодаря чему жидкость не вызывает отеков, не проникает в соединительную и мышечную ткань.
  • Резервное назначение — сохранение элементов белка. Молекулы альбумина отвечают за сохранность аминокислот, необходимых для правильного функционирования организма. Во время длительного голодания запасы аминокислот истощаются.

Внимание! Не игнорируйте врачебные рекомендации относительно сдачи биохимического анализа. Благодаря биохимии крови диагностируются патологии, связанные с колебаниями альбумина. Своевременная сдача анализа способствует предотвращению развития патологии и назначению эффективного лечения.

Альбумин: норма в крови

Нормы альбуминовой фракции в крови колеблются в пределах 35 -33 г / л, это намного больше содержания гамма-глобулина (8,0 — 12,0 — 17,0 г / л) и фибриногена (2,0 — 4,0 г / л), а в кровяной сыворотке фибриноген заметить затруднительно.

Нормы белка установлены в зависимости от возрастной категории людей. При сдаче анализа нормальный уровень в плазме у мужчины и женщины одинаковый, поэтому врач опирается на норму альбумина, исходя из возраста пациента.

Изображено: доли белков в крови человека

Ниже представлены нормы крови в зависимости от возрастной категории пациентов:

  1. Малыши с рождения до 3 лет — 25 — 50 г / л;
  2. Дети с 3 до 14 лет — 38 — 54 г / л;
  3. 14 — 60 лет — 33 — 55 г / л;
  4. Пожилые люди старше 60 лет — 34 — 48 г / л.

Стоит отметить, что: у людей зрелого возраста замечается понижение уровня альбумина в крови.

Таблица норм по возрастам

ВозрастАльбумин, г/лα1, г/лα2, г/лβ, г/лγ, г/л
От 0 до 7 дней32,5 – 40,71,2 – 4,26,8 – 11,24,5 – 6,73,5 – 8,5
От 1 недели до года33,6 – 42,01,24 – 4,37,1 – 11,54,6 – 6,93,3 – 8,8
От 1 года до 5 лет33,6 – 43,02,0 – 4,67,0 – 13,04,8 – 8,55,2 – 10,2
От 5 до 8 лет37,0 – 47,12,0 – 4,28,0 – 11,15,3 – 8,15,3 – 11,8
От 8 до 11 лет40,6 – 45,62,2 – 3,97,5 – 10,34,9 – 7,16,0 – 12,2
От 11 лет до 21 года38,9 – 46,02,3 – 5,37,3 – 10,56,0 – 9,07,3 – 14,3
После 21 года40,2 – 50,62,1 – 3,55,1 – 8,56,0 – 9,48,1 – 13,0

Норма альбумина в крови у женщин

Исследуя биохимический анализ крови беременной женщины, замечается снижение концентрации белка в плазме. Норма содержания альбумина во время вынашивания ребенка, в период лактации составляет 30 -34 г / л.

После родов и по окончании грудного вскармливания уровень белкового соединения в женском организме нормализуется до привычных значений.

Важная информация! Повышение или понижение альбумина обусловлено внешними и внутренними факторами и указывает на патогенный процесс в организме представительницы женского пола.

Иногда недостаток белка вызван физиологическими особенностями, ведь белки выделяются в организм будущей мамы и поступают к плоду. Сбалансированное питание, полноценный отдых способствуют нормализации альбумина у беременной.

Норма альбумина в крови у мужчин

Нормальный уровень альбумина у представителей мужского пола средних лет составляет 33 — 55 г/ л.

Норма альбумина у детей

Детские показатели также зависят от возраста и чем младше ребенок, тем ниже содержание альбумина в крови:

  • 0 — 7 дней — 32,5 — 40,7 г/ л;
  • 7 дней — 12 месяцев — 33,6 — 42,0 г/ л;
  • 1 год — 5 лет — 33,6 — 43,0 г/ л;
  • 5 — 8 лет — 37,0 — 47,1 г/ л;
  • 8 — 11 лет — 40,6 — 45,6 г/ л;
  • 11 лет — 21 год — 38,9 — 46 г/ л.

У юношей и девушек старше 21 года концентрация белкового соединения в крови варьируется в пределах 40,2 — 50,6 г/ л.

Внимание! Референтные значения в анализе, сдаваемом в разных лабораториях, различны. При сомнениях в результате проведения биохимического теста предлагается пересдать кровь в другом медицинском учреждении.

Норма белковых фракций в сыворотке крови

Белковые фракции в плазме кровиНорма, г/лСоотношение групп, %
Общий белок65 – 85
Альбумин35 – 5554 – 65
α1 (альфа-1)-глобулины1,4 – 3,002.05.2018
α2 (альфа-2)- глобулины5,6 – 9,1

Источник: https://normatela.com/krov/albumin-chto-eto-takoe

Альбумин в крови: что это такое, норма и отклонения, коррекция

Определение альбуминов в сыворотке крови

Уровень альбумина в крови определяется биохимическим анализом. Повышение или понижение уровня вещества указывает на нарушение в работе организма и развитие патологии. Показатель при анализе крови выясняется в обязательном порядке.

Что такое альбумин в анализе крови?

Печень — место синтеза альбумина

Альбумин — это главный белок в составе крови, который продуцируется печенью. На вещество приходится до 65% объёма плазмы крови. Распределяется белок не только по крови, но и в спинномозговой жидкости, лимфе и интерстициальной жидкости. Длительность функционирования вещества около 20 суток, после чего оно распадается.

Показатель вещества в крови позволяет выявить нарушения в работе печени и почек, а также развитие ревматизма или злокачественных опухолей.

Определение уровня белка не является единственным диагностическим методом, и при наличии отклонений показателя в большую или меньшую стороны требуется дополнительное обследование.

Если возникает подозрение на ошибочные данные анализа из-за неправильной подготовки пациента к сдаче материала, исследование проводится повторно.

Функции и разновидности альбуминов

Одна из функций альбуминов — транспортная

Белок выполняет в организме ряд функций, которые сохраняют его нормальное состояние. Главными из них являются:

  • транспортировка веществ в организме с кровью;
  • сохранение правильного давления плазмы, что предупреждает отеки;
  • сохранение дополнительного резерва аминокислот, которые необходимы для полноценной работы организма.

В анализах интерес представляет только сывороточный альбумин, который вырабатывается печенью и определяется в сыворотке крови. Вещество называют «человеческий сывороточный альбумин». Остальные разновидности белка не представляют интереса в анализе крови.

Нормы по возрастам

Показатели нормы зависят от возраста

Норма показателя изменяется в зависимости от возраста.

ВозрастПоказатель г/л
Детский возрастОт 32,5 до 45,6
Подростковый возрастОт 38,9 до 46
ВзрослыеОт 40,2 до 50,6

В редких случаях незначительное отклонение от нормы является индивидуальной особенностью человека и не сигнализирует о заболевании.

Повышение уровня: причины, симптомы

Обезвоживание при инфекциях приводит к повышению альбумина

Повышение уровня белка в крови в большинстве случаев сигнализирует о выраженном обезвоживании организма. Вызывается состояние длительной обильной рвотой или сильным поносом. Также оно может вызываться и тяжёлым переутомлением, обширными ожогами, сахарным диабетом и патологиями печени. Основные проявления нарушения следующие:

  • повышение температуры в вечерние часы;
  • слабость;
  • высокая утомляемость;
  • исхудание.

Дополнительно наблюдается обострение симптомов патологии, вызвавшей нарушение картины крови.

Снижение уровня: причины, симптомы

Патология почек может приводить к потере альбумина

Понижение уровня белка в крови встречается значительно чаще, чем повышение. Основные причины развития состояния такие:

  • нарушения в строении пищеварительной системы, которые приводят к неправильному усвоению питательных веществ;
  • хроническое воспаление в организме;
  • онкологический процесс;
  • патологии почек;
  • паразитарные поражения организма;
  • некротические процессы;
  • ревматизм;
  • значительные потери крови.

В период беременности понижение показателя является естественным, так как для развития плода требуется максимальное количество аминокислот и организму приходится расходовать резервы.

Яркая симптоматика нарушения отсутствует. Оно обычно определяется только анализом. Присутствуют лишь проявления основной болезни, которая вызвала падение уровня белка.

Показания к анализу

Беспричинная потеря веса — показание к анализу

Проводится анализ крови на объём белка в таких случаях:

  • хроническая усталость,
  • желтуха,
  • быстрое снижение веса,
  • отёки,
  • контроль эффективности лечения патологий печени и почек.

У беременных женщин биохимический анализ крови является частью комплексного обследования для контроля состояния.

Подготовка к исследованию

Если по жизненным показателям применяются лекарственные препараты, следует предупредить об этом лечащего врача, так как часть лекарств изменяет показатели уровня белка. Есть запрещается за 12 часов до проведения анализа крови. Также не желательно курить в этот период и пить кофе и крепкий чай. Физические и эмоциональные нагрузки исключаются за 6-8 часов до анализа.

Расшифровка анализа

Результаты анализов дополняют комплексную диагностику заболеваний

Расшифровка данных проводится лечащим врачом путем их сравнения с таблицей нормы. При желании пациент может сам сравнить показатели с нормой и понять, имеется ли отклонение.

Коррекция уровня альбумина в крови

Для коррекции показателя требуется проведение качественной терапии причины возникновения нарушения. Также больному показана диета с учётом того, повышен или понижен альбумин. При любом отклонении запрещаются употребление алкоголя и курение. Точно способ восстановления нормальной картины крови подбирает лечащий врач с учётом индивидуальных особенностей больного и его диагноза.

Источник: https://gidanaliz.ru/analiz/biohim/albumin-v-krovi.html

МедСекурс
Добавить комментарий